Оценка цитотоксичности слезозаместительных препаратов с использованием системы in vitro

Оценка цитотоксичности слезозаместительных препаратов с использованием системы in vitro

Цель: Анализ цитотоксического действия слезозаместительных глазных капель с различными консервантами и без них на эпителиальные клетки конъюнктивы и роговицы в условиях in vitro.

Материалы и методы. Объектом исследования явились семь слёзозаместительных препаратов: Хилабак®, Теалоз®, Систейн Ультра®, Катионорм®, Офтолик®, Артелак® Баланс, Оптив®. В качестве тест-систем были использованы трансформированные клетки нормальных тканей глаза: постоянные трансформированные клеточные линии конъюнктивы (Chang Conjunctiva, Clone 1-5c-4) и роговицы (HCEC) человека. Цитотоксичность «искус- ственных слез» оценивали по жизнеспособности клеток, культивируемых в питательных средах, содержащих в своём составе исследуемые препараты в концентрации 1, 5 и 10%. О жизнеспособности клеток судили по их морфологии и метаболической активности.

Результаты. Наибольшую чувствительность к действию исследуемых слезозаместителей показала тест-система на основе клеток роговицы человека. Четыре из семи исследуемых препаратов (Артелак® Баланс, Оптив®, Катионорм®, Офтолик®) в концентрации 10% от объема питательной среды проявили высокую степень токсичности в отношении клеток роговицы. Глазные капли Систейн Ультра® оказали умеренное токсическое действие на клетки роговицы и конъюнктивы в концентрации 5 и 10% от объема питательной среды. Слезозаместители Хилабак® и Теалоз® в этой концентрации не оказали цитотоксического действия на клетки ни одной тест-системы и показали наилучшие результаты при исследовании. Независимо от концентрации, наиболее токсичными для всех типов клеток оказались препараты Офтолик® и Артелак® Баланс.

Заключение. Установлена прямая зависимость между концентрацией исследуемых препаратов в питательной среде и их цитотоксичностью. Глазные капли Хилабак® и Теалоз®, не содержащие в своем составе консервант, не оказывали цитотоксическое действие на клетки обеих тест-систем при всех используемых концентрациях. Наименьшим токсическим эффектом из тестируемых слезозаместителей с «мягким» консервантом обладали глазные капли Систейн Ультра®, содержащие Поликвад®. Среди «искусственных слез» наибольшее токсическое действие на все типы клеток при всех используемых концентрациях было отмечено у глазных капель Офтолик (БАК 0,01%) и Артелак® Баланс (Оксид). Проведённые исследования показали принципиальную возможность использования систем in vitro для сравнительной оценки цитотоксического действия слезозаместителей.

Ключевые слова

Об авторах

младший научный сотрудник, отдел клеточных культур, лаборатория биологии клетки в культуре, группа клеточной биотехнологии,

Тихорецкий пр. 4, Санкт-Петербург, 194064

к.м.н., заведующий клинико-бактериологической лабораторией,

ул. Я.Гашека, 21, Санкт-Петербург, 192283

лаборант-исследователь, отдел клеточных культур, лаборатория биологии клетки в культуре, группа клеточной биотехнологии,

Тихорецкий пр. 4, Санкт-Петербург, 194064

д.м.н., профессор, зам. директора по научной работе,

ул. Я.Гашека, 21, Санкт-Петербург, 192283

к.б.н., ведущий научный сотрудник отдела клеточных культур, лаборатория биологии клетки в культуре, группа клеточной биотехнологии,

Тихорецкий пр. 4, Санкт-Петербург, 194064

Список литературы

1. Tsubota K., Kawashima M., Inaba T. The antiaging approach for the treatment of dry eye. Cornea. 2012;31:1:3–8. DOI:10.1097/ICO.0b013e31826a05a8

2. Versura P., Profazio V., Giannaccare G. Discomfort symptoms reduction and ocular surface parameters recovery with Artelac Rebalance treatment in mild–moderate dry eye. Europ. J. Ophthalmol. 2013;23:4:488–495. DOI:10.5301/ejo.5000267

3. Bron A., Tomlinson A., Foulks G., Pepose J., Baudouin C., Geerling G. Rethinking dry eye disease: a perspective on clinical implications. Ocul Surf. 2014;12:1-31. DOI: 10.1016/j.jtos.2014.02.002

4. Brzheskij V. V., Kalinina I. V., Popov V. Yu. [New possibilities of drug therapy of patients with corneal conjunctival xerosis]. [Clinical Ophthalmology]. Klinicheskaya oftal’mologiya. 2016;1:39-46. (In Russ.).

5. Baudouin C., Labbé A., Liang H., Pauly A., Brignole-Baudouin F. Preservatives in eye drops: the good, the bad and the ugly. Prog Retin Eye Res. 2010; 9:312-334. DOI: 10.1016/j.preteyeres.2010.03.001.

6. Epstein S., Ahdoot M., Marcus E., Asbell P. Comparative toxicity of preservatives on immortalized corneal and conjunctival epithelial cells. J Ocul Pharmacol Ther. 2009; 25:113-119. DOI: 10.1089/jop.2008.0098.

7. Whitson J., Petroll W. Corneal epithelial cell viability following exposure to ophthalmic solutions containing preservatives and/or antihypertensive agents. Adv Ther. 2012;29:874-888. DOI: 10.1007/s12325-012-0057-1

8. Wilson W., Duncan A., Jay J.. Effect of benzalkonium chloride on the stability of the precorneal tear film in rabbit and man. Br J Ophthalmol. 1975;59:11:667-669.

9. Danchenko E.O. [Assessment of cytotoxicity pharmaceuticals using cell cultures] Otsenka tsitotoksichnosti farmatsevticheskikh substantsiy s ispol’zovaniem kletochnykh kul’tur. [Immunology, Allergology, Infectology]. Immunopatologiya, Allergologiya, Infektologiya 2012;2: 22-31. (In Russ.).

10. Drozdov F.V., Mekhtiev A.R., Morozevich G.E., Timofeev V.P., Misharin A.Yu. [Cytotoxic derivatives (22R, 23R) — digidroxsistigmastana]. Tsitotoksichnye proizvodnye (22R, 23R) — digidroksistigmastana. [Bioorgan. Chemistry]. Bioorgan. khimiya. 2007; 33: 349-356. (In Russ.).

11. Eropkin M.Ju., Eropkina E.M. The cell cultures as a model system toxicity studies and screening of cytoprotective drugs. — SPb.: Morsar AV, 2003. (In Russ.).

12. Romanova S.G., Serebrennikova G.A., Shtil’ A.A. [Synthesis and study of properties of cytotoxic and hemolytic activity of cationic glycerolipids alkyl type]. Sintez, izuchenie tsitotoksicheskikh svoystv i gemoliticheskoy aktivnosti kationnykh glitserolipidov alkil’nogo tipa. [Annals of Moscow Technological University]. Vestnik Moskovskogo tekhnologicheskogo universtiteta. 2008;3:5:101-105. (In Russ.).

13. Anikina L.V., Puhov S.A., Dubrovskaja E.S., Afanas’eva S.V., Klochkov S.G. [Comparative determination of cell viability using the MTT and Resazurin]. Sravnitel’noe opredelenie zhiznesposobnosti kletok s pomoshch’yu mtt i resazurina. [Fundamental research]. Fundamental’nye issledovaniya. 2014; 12: 1423-1427. (In Russ.).

14. Aleksandrova O.I., Okolov I.N., Tahtaev Ju.V., Horol’skaja Ju.I., Hintuba T.S., Blinova M.I. [Comparative evaluation of the cytotoxicity of antimicrobial eye drops]. Sravnitel’naya otsenka tsitotoksichnosti antimikrobnykh glaznykh kapel’. [Ophthalmology journal]. Oftal’mologicheskie vedomosti. 2015;8:1:89-97. (In Russ.).

15. Aleksandrova O.I., Horol’skaja Ju.I., Majchuk D.Ju., Blinova M.I. [The study of general cytotoxicity of aminoglycoside antibiotics and fluoroquinolone in cell cultures]. Issledovanie obshchey tsitotoksichnosti antibiotikov aminoglikozidnogo i ftorkhinolonovogo ryada na kletochnykh kul’turakh. [Annals of Ophthalmology]. Vestnik oftal’mologii 2015;5:39-48. (In Russ.).

16. Aleksandrova O.I., Okolov I.N., Horol’skaja Ju.I., Blinova M.I., Churakov T.K. [Assessing the impact of benzalkonium chloride and cytotoxicity Nettatsin Tobrex eyedrops under conditions in vitro]. Otsenka vliyaniya benzalkoniya khlorida na tsitotoksichnost’ glaznykh kapel’ Nettatsin i Tobreks v usloviyakh in vitro. [Modern technologies in ophthalmology]. Sovremennye tekhnologii v oftal’mologii. 2016;3:163-166. (In Russ.).

17. Vechkanov E.M., Sorokina I.A. [Basics of Cell Engineering, Rostov-on-Don]. 2012. (In Russ.).

18. Mosmann T. Rapid colorimetric assay for cellular growth and survival: application to proliferation and cytotoxicity assay. J. Immunol. Meth. 1983;65:1–2:55–63.

19. Cancer cell culture: methods and protocols / Ser. Methods in Molecular Medicine. (Ed. S.P. Langdon). Totowa, NJ: Humana Press, 2003; 88:165-169.

20. In vitro toxicity testing protocols / Ser. Methods in Molecular Biology. Vol. 43. (Eds S.O’Hare, C.K. Atterwill). Totowa, NJ: Humana Press, 1995;43:138–149.

Для цитирования:

Александрова О.И., Околов И.Н., Хорольская Ю.И., Панова И.Е., Блинова М.И. Оценка цитотоксичности слезозаместительных препаратов с использованием системы in vitro. Офтальмология. 2017;14(1):59-66. https://doi.org/10.18008/1816-5095-2017-1-59-66

For citation:

Aleksandrova O.I., Okolov I.N., Khorolskaya Yu.I., Panovа I.E., Blinova M.I. Cytotoxicity Evaluation of Tear Substitutes Using in vitro System. Ophthalmology in Russia. 2017;14(1):59-66. (In Russ.) https://doi.org/10.18008/1816-5095-2017-1-59-66

alt=»Creative Commons License» width=»» />
Контент доступен под лицензией Creative Commons Attribution 4.0 License.

У меня сохнут глаза. Как выбрать нормальные капли?

Много работаю за компьютером, и у меня все время сохнут глаза. Фармацевт в аптеке советовала мне потрясающее разнообразие капель: «Дефислез», «Тауфон», «Офтолик», «Систейн». И стоят такие капли совсем по-разному : «Дефислез» — 50 Р , а «Систейн» — 500 Р . С чем связана цена на капли и как выбрать подходящие?

У сухости глаз может быть множество причин — от воспаления слезных желез, неправильного строения века и повышенного испарения слез до последствий непрерывного ношения контактных линз, лазерной коррекции зрения и злоупотребления глазными каплями. Чтобы облегчить симптомы, при всех этих заболеваниях применяют глазные капли.

Но капли помогут не всегда. Чтобы победить сухость глаз, могут потребоваться рецептурные препараты, которые выпишет врач. В этой статье мы будем говорить только о глазных каплях и гелях, которые продаются без рецепта. Их еще называют искусственными слезами.

О сухости глаз — статья на Uptodate

Лучше сходить к врачу

Наши статьи написаны с любовью к доказательной медицине. Мы ссылаемся на авторитетные источники и ходим за комментариями к докторам с хорошей репутацией. Но помните: ответственность за ваше здоровье лежит на вас и вашем лечащем враче. Мы не выписываем рецептов, мы даем рекомендации. Полагаться на нашу точку зрения или нет — решать вам.

Что важно знать об искусственных слезах

Искусственные слезы отличаются по составу. Универсального увлажнителя для глаз, который подошел бы всем без исключения людям, не существует. Возможно, придется попробовать несколько видов капель с разным составом.

Правила выбора искусственных слез — статья на сайте американской Клиники Майо

Искусственные слезы бывают двух типов: с консервантами и без них. Капли с консервантами обычно продаются в больших флаконах, которые предназначены для многократного использования. Такие капли дольше хранятся и поэтому стоят дешевле. Но у некоторых людей с сильной сухостью глаз капли с консервантами раздражают слизистую. Если вам приходится капать в глаза чаще четырех раз в день, покупайте капли без консервантов. Они обычно продаются в маленьких одноразовых флаконах по 10—20 штук в упаковке.

Искусственные слезы иногда выпускают в виде гелей. Такие средства гуще, поэтому дольше остаются на поверхности роговицы, так что пользоваться ими можно реже, чем каплями. Однако они вызывают временное помутнение зрения, и их рекомендуется применять перед сном.

Искусственные слезы с поливиниловым спиртом

Что это такое. Поливиниловый спирт похож на муцин — компонент естественной слезы, который работает как смазка для глаз и препятствует испарению жидкости с их поверхности. Иногда поливиниловый спирт заменяют повидоном или добавляют в капли сразу оба вещества.

Цена капель зависит от того, содержит ли они консерванты. Без консервантов обычно стоят немного дороже.

Капли для глаз UrsaPharm Раствор увлажняющий офтальмологический Хилозар-Комод — отзыв

Увлажняющие капли для глаз Хилозар-комод или Хило-комод? Что лучше и в чём между ними разница?

Я пользовалась и каплями для глаз Хило-Комод, и каплями Хилозар-Комод. И те и другие назначал мне офтальмолог. И, честно говоря, я сначала даже не поняла в чём разница между ними. Подумала, что это одни и те же капли просто их переименовали из-за ребрендинга. Тем более у Хило-Комод и Хилозар-Комода даже упаковки одинаковые.

Если коротко, то отличий в качестве в увлажнении глаз я не заметила. Хороши и те, и те.

Но тем не менее это разные капли!

Отличие между ними состоит во вспомогательных веществах. В Хилозар-Комод есть натрия гидрофосфат дигидрат и декспантенол, в Хило-Комод — лимонная кислота и цитрат натрия. В первом практически отсутствуют консерванты, поэтому стоит дороже. Первое лекарство нельзя применять через 12 недель после вскрытия емкости, второе можно применять до 6 месяцев.

Оказывается Хилозар-Комод в отличие от Хило-Комода почти не содержит консервантов в составе.

На коробке написано, что их нет совсем, но по факту это не совсем так.

ХИЛОЗАР-КОМОД содержит: Натрия гиалуронат (натриевая соль гиалуроновой кислоты) — 1,0 мг Декспантенол — 20,0 мг Натрия дигидрофосфат дигидрат, натрия гидрофосфат дигидрат, сорбитол, вода.
ХИЛО-КОМОД содержит: Натрия гиалуронат (натриевая соль гиалуроновой кислоты) — 1 мг Лимонная кислота безводная, натрия цитрат, сорбитол, вода.

Вот, собственно и вся разница. Для тех, кто досконально изучает составы это, видимо, важно. А лично для меня это ни о чём не говорит кроме более высокой цены. Хилозар-Комод чуть дороже, чем Хило-Комод.

Итак, Хилозар-Комод (раствор увлажняющий офтальмологический):

• где купить: в любой аптеке, без рецепта;
• цена: 557 рублей;
• объём: 10 мл.;
• производитель: УРСАФАРМ, Германия;
• показания:

ощущение сухости и песка в глазах

дополнительное увлажнение передней поверхности глаза (роговицы и конъюнктивы)

повреждения и травмы роговицы

ношение мягких или жёстких контактных линз

после офтальмологических хирургических операций

• состав:

натрия гидрофосфат дигидрат и декспантенол

• срок годности и условия хранения: радует, что их не надо класть в холодильник, они выдерживают температуру до +25. И после вскрытия ими можно пользоваться целых 12 недель, хотя обычно глазные капли быстро портятся.

Почему мне назначили Хилозар-Комод?

1. покраснение глаз при перелётах в самолёте, поездках в метро, иногда при посещении торговых центров;
2. ощущение сухости в глазах.

Хилозар-Комод: мои впечатления:

• упаковка: считаю её жутко неудобной. эти капли похожи на кондитерский шприц, дозатор закрыт защитным колпачком, флакон сделан качественно, но как-то чрезмерно заморочено, я считаю. Мне им пользоваться не особо удобно — всё время боюсь ткнуть себе в глаз при нажатии на поршень. И флакон не прозрачный. вы не контролируете расход. Флакон — это их единственный минус;

• капли: они очень мягкие, при закапывании в глаза нет вообще никакого дискомфорта или покраснения;

• результат: лично у меня результат был накопительный, сначала я капала им глаза 3-5 раз в день, сейчас мне хватает 1-2 раз или я не капаю ими вовсе, так как нет необходимости. Краснота с глаз уходит МОМЕНТАЛЬНО, я один раз их даже проверила после того, как поплакала — краснота исчезла прям на глазах. В самолёте я без них вообще жить не могу — глазища, как у быка краснеют;

• подходят для тех кто носит контактные линзы: я их не ношу, у меня всего -0.5 зрение, но читала отзывы, что многие девушки с линзами ими тоже довольны.

ВАЖНО: для меня немаловажный факт, что Хилозар-Комод — это лечебные капли, а не косметические. Они реально увлажняют глаза, а не просто сужают сосуды, временно нейтрализуя таким образом покраснение. Они лечат.

ВЫВОД: я безоговорочно рекомендую увлажняющие капли для глаз Хилозар-Комод всем, кто страдает от сухости и красноты глаз, много работает за компьютером или в помещениях с пересушенным воздухом. Эти капли прекрасно увлажняют глаза и лечат их. Они не косметические, они лечебные! Я пробовала много разных капель, но Хилозар-Комод — это пожалуй пока что лучшая скорая помощь для моих чувствительных глаз.

✔ Однажды я умудрилась стереть слёзную плёнку с глаз. как меня вылечили?

___________________________________________________________________________________________

В моём профиле вы сможете найти отзывы на самые разные темы: китайские и люксовые покупки, а также медикаменты, ремонт, растениеводство и многое-многое другое — WELCOME!

П О Д П И С Ы В А Й Т Е С Ь, чтоб быть в курсе моих новых обзоров!

___________________________________________________________________________________________

Препараты для профилактики и лечения синдрома сухого глаза

Является увлажняющим офтальмологическим раствором, содержащим гиалуроновую кислоту и электролиты (хлориды натрия, калия, кальция и магния). Применяется для облегчения дискомфорта при ношении мягких и жестких контактных линз. Уменьшает ощущение сухости, раздражения и усталости глаз.

Действующее вещество: Гипромеллоза

Гипромелоза-П (капли глазные) (Юнимед фарма)

Дефислез
(капли глазные) (Синтез)

Искусственная слеза
(капли глазные) (Фирн М)

Защищает роговицу, оказывает смазывающее и смягчающее действие, обладает высокой вязкостью, что увеличивает продолжительность контакта раствора с роговицей. Применяется при недостаточном слезоотделении, деформации век, состоянии после пластических операций на веках, ожогов роговицы и конъюнктивы, после удаления инородных тел и токсических веществ из глаза. Уменьшает раздражение глаз, вызванное дымом, пылью, холодом, ветром, солнцем и соленой водой. Может применяться при аллергии, а также при использовании контактных линз и для дезинфекции слезной жидкости.

Действующее вещество: Декстран + гипромеллоза

Слеза
натуральная (капли глазные) (Алкон фармасьютикалз)

Слезин
(капли глазные) (Ромфарм)

Восполняет дефицит слезной жидкости и улучшает увлажнение роговицы. После однократного закапывания действие препарата сохраняется в течение 90 минут.

Действующее вещество: Карбомер

Офтагель
(гель глазной) (Сантэн)

Видисик
(гель глазной) (Бауш энд Ломб)

Препарат для увлажнения и защиты роговицы. Содержит высокомолекулярный полимер. Увеличивает вязкость слезы, образуя защитную увлажняющую пленку на поверхности роговицы. При одновременном применении гель может продлевать всасывание других офтальмологических лекарственных средств. Показаниями к применению является сухой кератоконъюнктивит, раздражение глаз, недостаточное слезоотделение и ряд других заболеваний. Используется в восстановительном периоде после лазерных и хирургических операций на роговице. Сразу после закапывания возможны преходящее затуманивание зрения, кратковременное ощущение жжения и местное раздражение глаз.

Действующее вещество: Натрия гиалуронат

Хило-комод (капли глазные) (Урсафарм
Арцнаймиттель)

Представляет собой стерильный водный раствор натрия гиалуроната. Образует на поверхности роговицы равномерную, сохраняющуюся в течение длительного времени слезную пленку, которая не смывается при моргании и не вызывает снижение остроты зрения. Не содержит консервантов. Делает ношение жестких или мягких контактных линз более комфортным. Рекомендуется для дополнительного увлажнения роговицы и конъюнктивы при ощущении сухости, чувстве инородного тела, жжении в глазах, а также после офтальмологических хирургических операций и при повреждениях роговицы.

Действующее вещество: Повидон

Вид-комод
(капли глазные) (Урсафарм
Арцнаймиттель)

Представляет собой стерильный 2%-ный водный раствор повидона. Рекомендуется для дополнительного увлажнения роговицы и конъюнктивы, устранения дискомфорта при ощущении сухости, инородного тела, жжении в глазах, возникающих под воздействием климатических факторов и интенсивной зрительной нагрузки, а также при ношении мягких и жестких контактных линз.

Действующее вещество: Препарат сложного состава

Систейн Баланс (капли глазные) (Алкон Фармасьютикалз)

Увлажняет поверхность глаза, стабилизирует жировой слой слезной пленки и уменьшает испарение слезной жидкости. Обеспечивает временное облегчение таких симптомов синдрома сухого глаза, как чувство жжения и раздражение.

Систейн Гель (гель глазной) (Алкон Фармасьютикалз)

Применяется для снятия симптомов синдрома сухого глаза: дискомфорта, жжения и раздражения. Смазывает и восстанавливает глазную поверхность, защищая ее от дальнейшего повреждения.

Систейн Ультра (капли глазные) (Алкон Фармасьютикалз)

Одно из самых мощных средств для профилактики и лечения синдрома сухого глаза. Увлажняет поверхность роговицы, обеспечивает длительный комфорт в течение дня. Устраняет последствия снижения частоты мигания в результате длительного просмотра телепередач или долгой работы за компьютером. Применяется для увлажнения и увеличения комфорта глаз при раздражении, вызванном дымом, пылью, холодом, ветром, солнцем, соленой водой, при аллергии, а также при использовании контактных линз. Может применяться по мере необходимости.

Блефарогель 1 (гель) (Гельтек)

Блефарогель 2 (гель) (Гельтек)

Основу геля составляет гиалуроновая кислота, которая обладает увлажняющими свойствами, регулирует содержание влаги в коже век. Другим компонентом является экстракт алоэ вера, который обладает противовоспалительными, антисептическими и тонизирующими свойствами. Данный экстракт помогает устранить симптомы раздражения в области век, улучшает обмен веществ, устраняет сухость глаза и снимает ощущение усталости глаз.

В состав «Блефарогеля 2» входят препараты серы, обладающие антисептическим действием. После применения препарата на веках уменьшается или полностью устраняется популяция клещей-паразитов (демодекса). Показаниями к применению является профилактика и снятие воспалительных явлений век, профилактика и лечение синдрома сухого глаза, профилактика возникновения ячменя, а также – нарушение слезопродукции, вызванное ношением контактных линз, и ощущения усталости глаз. Гель может применяться как средство ежедневной гигиены. При попадании его в глаза возможно кратковременное жжение, которое проходит в течение одной минуты и не требует дополнительного лечения.

Визин
Чистая слеза (увлажняющее офтальмологическое средство) (Джонсон &
Джонсон)

Увлажняющее средство создано на основе натурального растительного экстракта, схожего по составу с человеческой слезой. Подходит для регулярного использования, значительно улучшает стабильность слезной пленки. Снимает сухость и усталость глаз, которые могут возникнуть при работе за компьютером, вождении автомобиля, ношении контактных линз, чтении, плохой освещенности. Способствует оздоровлению роговицы и конъюнктивы глаза, обеспечивая длительный увлажняющий эффект.

Помните, самолечение опасно для жизни, за консультацией по поводу применения любых лекарственных препаратов обращайтесь к врачу.